Revista Farmabiotec Número 8

#8 farmaBIOTEC 87 de Microbiología del Instituto de Salud Carlos III, es desde hace más de 25 años Centro Colaborador de la OMS. Entre sus funciones destacan el apoyo al Sistema Nacional de Salud y a la OMS, con técnicas de diagnóstico y estudios con los que abordar importantes huecos del conocimiento sobre la enfermedad y la biología de Leishmania que ayu- den a la población afectada. En este sentido, y debido a que en los últimos años se están realizando grandes avan- ces tecnológicos en el análisis de alto rendimiento del ADN o de las proteínas (las denominadas “ómicas”), se ha establecido un grupo de trabajo multidisciplinar enmar- cado en el Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Infecciosas (CIBERINFEC) que incluye a profesionales de distintos grupos de investigación en lei- shmaniasis, así como clínicos, para desarrollar nuevos estudios y análisis basados en estrategias ómicas. Caracterización molecular de Leishmania Estudios recientes basados en técnicas de secuencia- ción masiva (NGS) del ADN de Leishmania están eviden- ciando la necesidad de realizar una caracterización mole- cular completa del parásito responsable de los casos de leishmaniasis en España. Gracias a la colaboración con el grupo de investigación del Dr. Jose María Requena en el Centro de Biología Molecular Severo Ochoa (Universidad Autónoma de Madrid), se han conseguido identificar en España dos grandes poblaciones de cepas genéticamente distintas de Leishmania mediante un nuevo tipo de análi- sis filogenético basado en la secuencia completa del maxi- círculo del parásito, una estructura característica de este grupo de microorganismos equivalente al ADN mitocondrial 2 . Además, gracias al trabajo previo de este grupo para ensam- blar y caracterizar el genoma de referencia de la especie L. infantum , ha sido posible realizar un estudio genómico completo de estas dos poblaciones 3 . Una de ellas muestra un perfil genético estable que podría asociarse con las cepas de L. infantum responsables de los casos que han venido pro- duciéndose habitualmente en nuestro país. La otra población coexiste con la anterior en la misma área geográfica, pero parece encontrarse en mitad de un proceso evolutivo muy activo, evidenciado por una gran variabilidad en la secuencia de su genoma, posiblemente debido a fenómenos de hibri- dación con otras cepas y especies de Leishmania y/o a la adaptación a nuevos hospedadores2. Algunos indicios apun- tan a que esta población puede estar relacionada con el gran aumento de casos de leishmaniasis humana registrado hace 10 años en el área metropolitana del suroeste de Madrid, que terminó por convertirse en el mayor brote de leishmaniasis en Europa. Precisamente en este brote se han identificado a liebres y conejos como nuevos hospedadores reservorios de la enfermedad (además del perro), con un papel clave en su desarrollo 4 . Esta variabilidad genética confiere a Leishmania una gran plasticidad con la que es capaz de adaptarse fácil- mente a cambios en el entorno, y es la herramienta funda- mental para evadir la respuesta inmunitaria e incrementar su virulencia y/o la probabilidad de adquirir resistencia al tratamiento antiparasitario . De manera complemen- taria a un estudio in vitro para determinar la resistencia de cada cepa a los fármacos, el análisis genómico está permitiendo identificar que esta adaptación se asocia no solo con mutaciones en el genoma sino también con un aumento o disminución del número de copias de estos genes o incluso de las regiones cromosómicas en las que se encuentran. Esto puede conllevar cambios en la expre- sión de otros muchos genes cercanos que pueden estar implicados en la resistencia o susceptibilidad hacia otros fármacos, o en la virulencia del parásito. De este modo, pueden estar seleccionándose resistencias de forma inad- vertida incluso sin una exposición previa al fármaco. Dado que el tratamiento se basa en un número muy limitado de fármacos, estos análisis son fundamentales para elegir el mejor tratamiento y evitar un importante riesgo epidemio- lógico de salud pública. Búsqueda de nuevos biomarcadores en leishmaniasis Gracias a la buena salud general de la población en España la mayoría de infecciones son asintomáticas. Sin embargo, esto no es así en parte de la población que se encuentra en un estado de inmunosupresión, cuya pro- babilidad de desarrollar leishmaniasis tras una primera infección puede aumentar hasta 418 veces con respecto a la población general. Por ejemplo, es bien conocida la asociación entre leishmaniasis y la inmunosupresión debida a la coinfección con VIH 5 . En estos pacientes existe un elevado riesgo de fracaso terapéutico y recaída por la reactivación de la multiplicación de los parásitos tras el tratamiento antiparasitario, muchas veces mantenido de forma profiláctica. Por otro lado, existe un uso cada vez mayor de fármacos inmunosupresores para el tratamiento de enfermedades autoinmunes y el manejo de individuos trasplantados. Este tipo de inmunosupresión farmacoló- gica tiene complicaciones adicionales cuando se asocia a una infección con Leishmania porque no siempre es posible retirar el tratamiento inmunosupresor cuando se detecta el caso de leishmaniasis sin poner en riesgo al paciente, ni tampoco está claro cuándo se puede volver a introducir sin riesgo de recaída. El tratamiento para la leishmaniasis tiene importantes efectos secundarios, por lo que su administración continuada produce problemas de salud y, además, si debido a las recaídas es necesario repetir pautas de tratamiento con eficacia incompleta se favorece la aparición y selección de cepas de Leishmania Terapia génica