Revista Farmabiotec 22

48 farmaBIOTEC #22 capaces de generar resultados translacionales. El pro- yecto combina líneas celulares modificadas, sistemas intestino-en-chip y modelos tridimensionales, creando un pipeline que acerca la investigación preclínica a la realidad fisiológica humana y sienta las bases para tera - pias innovadoras frente a inflamación intestinal y cáncer colorrectal. Pharmanova II: integración de NAMs en investigación aplicada Pharmanova II tiene como objetivo desarrollas meto- dología in vitro que permita identificar biomoléculas con potencial terapéutico frente a inflamación intestinal y cáncer colorrectal (CCR). En este sentido añade un valor diferencial al incorporar de forma sistemática Nuevas Metodologias Alternativas (New Approach Methodologies (NAMs)), alineadas con las estrategias regulatorias euro - peas (EMA, SRIA) y orientadas a reducir el uso de anima - les, aumentar la predictividad y acelerar la innovación. Plataforma avanzada de cribado celular Pharmanova II ha desarrollado una plataforma de cri- bado celular que representa un salto cualitativo respecto a los sistemas convencionales. Esta plataforma se basa en 2 líneas celulares humanas modificadas mediante la tecnología CRISPR incorporando dos modelos clave: uno reportero de NF-κB , que permite monitorizar la activación de rutas inflamatorias, y otro con inflamación endógen a para la simulación de un microambiente patológico sin necesidad de inducción externa. La validación de estas líneas se ha realizado mediante técnicas moleculares avanzadas como q PCR, western blot, secuenciación dirigida y ensayos funcionales de luciferasa, garantizando robustez y reproducibilidad. Una vez confirmada su funcionalidad, estas plataformas se han utilizado para evaluar biomoléculas naturales y com - puestos proporcionados por empresas colaboradoras como Monteloeder y Terra Nova Foods , demostrando su utilidad como herramienta predictiva para la identifica - ción de compuestos con actividad antiinflamatoria. Además, estas líneas están preparadas para inte- grarse en modelos dinámicos como el intestino-en-chip y en sistemas tridimensionales, reduciendo tiempos de desarrollo y disminuyendo el uso de animales en fases preclínicas. Sistema dinámico: intestino-en-chip Tras la fase de cribado, el proyecto evoluciona hacia un modelo de intestino-en-chip que integra tecnologías de microfluídica y co-cultivos celulares, reproduciendo con - diciones fisiológicas más próximas al entorno intestinal humano. Este enfoque permite simular gradientes diná - micos de flujo, interacciones célula-célula y exposición controlada a compuestos, ofreciendo una plataforma avanzada para estudios preclínicos. En Pharmanova II , el sistema se ha optimizado mediante la incorporación de una línea celular modificada que posibilita la monitorización in situ del biomarcador inflamatorio seleccionado y la evaluación directa de la respuesta frente a compuestos bioactivos. El modelo permite controlar el flujo, la exposición a compuestos y las condiciones microambientales , así como analizar parámetros como secreción de citoquinas, expresión génica y viabilidad celular. Todo ello proporciona datos en condiciones in vitro que resultan más representativas que los modelos estáticos convencionales . Su diseño permite ensayos paralelos y comparativos, aumentando reproducibilidad y reduciendo costes. Esferoides intestinales: antesala de organoides. Como paso intermedio hacia modelos más complejos, Pharmanova II ha permitido incorporar la tecnología de esferoides intestinales , obtenidos a partir de células humanas de carcinoma colorrectal mediante cultivo en agitación. Estos esferoides son estructuras tridimen- sionales que reproducen parcialmente la arquitectura y funcionalidad del tejido intestinal. La obtención y carac - terización de este modelo se lleva a cabo mediante tec- nologías avanzadas de cultivo celular, microscopía de fluorescencia y confocal, análisis de marcadores celu - lares y estudios de expresión génica en rutas inflama - torias. Además, el proyecto ha desarrollado un modelo de esferoide inflamado , que permite evaluar el efecto de compuestos con potencial actividad antiinflamatoria en un contexto tridimensional más cercano a la fisiología intestinal. Resultados destacados Pharmanova II ha generado resultados concretos que evidencian la madurez de las Nuevas Metodologías Avanzadas (New Approach Methodologies (NAMs)) implementadas y marcan un avance significativo para la aplicación de las mismas en la búsqueda de compuestos con potencial terapéutico. Un sistema de cribado celular avanzado mediante la generación de líneas celulares editadas mediante CRISPR que muestran activación específica de rutas infla - matorias, como NF-κB, y permiten discriminar compues - tos con actividad antiinflamatoria, incluyendo extractos validados de empresas colaboradoras como Monteloeder y Terra Nova Foods. Drug development