Revista Farmabiotec - Número 18

38 farmaBIOTEC #18 la senescencia, la acumulación de aberraciones cromosó- micas y la activación de oncogenes. Una elevada acumu- lación de duplicaciones de la población (CPD en inglés) como consecuencia de un largo periodo de cultivo se aso- cia con la senescencia celular, a su vez altamente rela- cionada con la inestabilidad genética y la transformación celular [5] . Éstos riesgos hacen indispensable el diseño de bioprocesos dimensionados por un lado a las caracterís- ticas de las células y, por el otro, a las necesidades de escalado de producción, así como de la implementación de controles de calidad durante el proceso de expan- sión (también llamados in-process controls o IPCs), que incluyen: • Monitoreo de la identidad, viabilidad y prolifera - ción celular: Se emplea citometría de flujo, ensayos de recuento y viabilidad, y se calculan las tasas de prolifera- ción para asegurar que las células mantienen sus propie- dades funcionales. • Evaluación de la estabilidad genética: Se realizan análisis citogenéticos como el análisis del cariotipo y pruebas de secuenciación del genoma para detectar posi- bles alteraciones cromosómicas o mutaciones que pue- dan comprometer la seguridad del producto. • Control del tiempo en cultivo: Se establecen límites de CPD (habitualmente <40) para minimizar el riesgo de senescencia y la acumulación de mutaciones adversas. Control de contaminación y bioseguridad Las células expandidas ex vivo no pasan por un pro- ceso de esterilización o filtración, sin embargo, se debe garantizar la esterilidad del producto final. Dado que las células cultivadas pueden ser altamente susceptibles a contaminaciones microbianas, se aplican estrictos proto- colos de bioseguridad en laboratorios NCF, que incluyen: • Ambientes de trabajo controlados: Las salas blancas son instalaciones que permiten la contención de posibles contaminaciones. Se clasifican según las partículas pre - sentes en el aire, siendo las de clasificación ISO 5 o supe - rior las que aseguran un ambiente estéril para la manipu- lación celular [6] . • Recomendación de uso de medios de cultivo libres de componentes de origen animal: Esto reduce el riesgo de transmisión de patógenos zoonóticos y la variabilidad en el crecimiento celular. • Pruebas microbiológicas rutinarias: Se realizan con- troles para detectar bacterias, hongos, micoplasma y endotoxinas en cada lote de producción. Estos controles Sala blanca en el Banc de Sang i Teixits (Barcelona). Red TERAV