Revista Farmabiotec Número 14

#14 farmaBIOTEC 73 candidatos a fárma - cos en la fase pre - clínica temprana. Por otra parte, el ensayo Acutetox es un ensayo eficiente en tiempo y renta - bilidad, en compa - ración con otros ensayos utilizados actualmente. Ensayo Teratotox Este ensayo permite evaluar el potencial de un fármaco para interferir en el desarrollo normal y causar efectos adver - sos en la descendencia. La toxicidad reproductiva es una de las principales preocupaciones y diferentes directrices, como la ICH S5(R2), establecen la necesidad de evaluar la seguri - dad química durante el proceso de desarrollo de un fármaco o antes de su comercialización. El pez cebra es un modelo in vivo adecuado para los estu- dios teratogénicos ya que sus embriones se fertilizan exter - namente y se desarrollan rápidamente, de forma que los resultados pueden analizarse desde las 2 - 4 horas después de la fertilización hasta sus 5 días, durante el desarrollo de los órganos. Para este ensayo se podría utilizar una línea de embriones de pez cebra que expresan una proteína verde fluorescente en el corazón, tal y como se muestra en la siguiente imagen: A las 2-4 hpf los embriones se tratan a 8 concentraciones por compuesto y se incuban hasta los 2 y 4 días post-ferti - lización (dpf), cuando son analizados bajo el estereoscopio. De esta forma se calcula la concentración mínima a la que se induce la letalidad y se analizan diferentes órganos y proce - sos, incluidos puntos finales teratogénicos y tóxicos. Se calcu - lan así los valores de EC50, LC50 para el Índice Teratogénico (TI) y NOAEL. También pueden llevarse a cabo análisis com - plementarios como la biodisponibilidad por HPLC-MS/MS, la histopatología o expresión de genes de interés. Ensayos de toxicidad específica Ensayo de Neurotoxicidad Diferentes estudios han detectado estrechas similitudes en las vías de señalización neuronal y las regiones funcionales del cerebro entre los humanos y el pez cebra. Se han obser - vado alteraciones en el patrón demovilidad de las larvas indu- cidas por fármacos conocidos que apoyan firmemente al pez cebra como modelo predictivo de la neuroactividad en huma - nos. Biobide ha desarrollado un ensayo para evaluar la neuro - toxicidad basado en las alteraciones del comportamiento en las respuestas a los cambios de luz-oscuridad. Para este ensayo se utilizan embriones de pez cebra de 5 dpf y se tratan durante 2 horas con 5 concentraciones por compuesto. La actividad locomotora/respuesta fotomotora del pez cebra se analiza durante 40 minutos alternando foto - periodos de 10 minutos utilizando el sistema DanioVision ali- mentado por Ethovision (Noldus). Además, también se pue - den analizar factores como la viabilidad, la formación de la vejiga natatoria, la presencia de edema, defectos en la forma del cuerpo y la pérdida del equilibrio. Se pueden analizar más de 10 parámetros en base a la distancia recorrida, la veloci - dad, duración del movimiento y la frecuencia. El efecto neurotóxico también puede analizarse durante el desarrollo, con el ensayo de Desarrollo de Neurotoxicidad (DNT), exponiendo los embriones a 5 concentraciones de los compuestos de interés desde las 3-6 hpf hasta las 120 hpf, durante todo el desarrollo, e incluyendo no solo el análisis del movimiento sino también las alteraciones morfológicas de los mismos. Ensayos de ecotoxicidad El campo de la ecotoxicología ha avanzado rápidamente en los últimos 50 años y se refiere al estudio de los efectos que las sustancias químicas y otros contaminantes tienen no solo sobre la salud humana sino en el medio ambiente. Muchas sustancias creadas por el hombre, como los pesti - cidas y los productos químicos, contienen componentes que pueden interactuar con los organismos del medio ambiente, dañando el ecosistema del planeta y provocando contami - nación ambiental. También existen toxinas en compuestos naturales, como el plomo y el arsénico, que pueden ser muy peligrosos para la salud humana. Para evaluar la seguridad y/o los efectos nocivos de estos productos químicos, existen varias pruebas de ecotoxicidad. Estos métodos evalúan el efecto de la supervivencia, reproducción, crecimiento y rendi - miento después de la exposición a sustancias químicas. Biobide ha desarrollado diferentes ensayos de ecotoxici - dad miniaturizados basados en las guías de la OECD pero de forma simplificada, incluida la prueba de toxicidad de algas en microplacas basándose en la guía de la OECD 201, el Figura 3. Embrión de pez cebra silvestre de 5 dpf. Ensayos clínicos