Revista Farmabiotec Número 11

58 farmaBIOTEC #11 En todos ellos, las células inmunológicas del propio paciente se modifican con receptores de antígenos qui - méricos (CAR); y una vez reintroducidas en el paciente, instruyen al sistema inmunológico para reconocer y eli- minar las células tumorales. La generación de células CAR-T implica cinco pasos básicos. En primer lugar, las células T se aíslan del plasma sanguíneo del paciente. Posteriormente, las célu- las se activan para aceptar un vector viral que contiene la construcción genética para el CAR. Después se expan - den en cultivo y, finalmente, se administran al paciente por vía intravenosa. Aunque las terapias aprobadas usan muestras de pacientes, hay interés en utilizar células T alogénicas proporcionadas por donantes 1 . Dado que las terapias con células CAR-T provienen del donante, cada dosis fabricada es única; lo que origina importantes desafíos en cuanto al control de calidad se refiere, pues debe garantizarse que, tras la fabrica - ción, almacenamiento, envío y administración, la dosis final cumple con los criterios de seguridad, estabilidad y potencia necesarios 2 . Una herramienta importante que ayuda a verificar la identidad celular a lo largo del proceso de fabricación es el análisis de las repeticiones cortas en tándem (del inglés Small Tandem Repeats), una técnica de identifi - cación genética ampliamente utilizada en la comunidad forense y que también se emplea como método de elec- ción para autenticar líneas celulares en investigación 3 . El genoma humano contiene regiones de ADN repeti- tivo, denominadas regiones hipervariables, que consis- ten en una secuencia corta de ADN repetida en tándem. Estas regiones STR son polimórficas, ya que la secuen - cia varía en el número de copias de la unidad repetida. Las longitudes de cualquier alelo STR dado variarán de un individuo a otro, y medir por electroforesis capilar la longitud de múltiples alelos STR proporciona perfiles genéticos fiables. En la fabricación de células CAR-T, el perfil STR se puede recopilar en cualquier momento del proceso para confirmar que las células derivan del paciente o donante original. En primer lugar, se recopila un perfil STR de refe - rencia a partir de un subconjunto de células aisladas del paciente. Luego, las células se analizan en diversas eta- pas durante el proceso de fabricación para confirmar que el perfil resultante coincida con el original. Si se producen confusiones de muestras o si las muestras se contami- nan con células de otros individuos en la fabricación, almacenamiento o envío, el análisis STR lo identifica. El análisis STR también puede emplearse en terapias experimentales sobre el uso de células T alogénicas, y así emplear células recolectadas en donantes sanos, determinando el porcentaje de células CAR-T alogénicas en una mezcla de células y sabiendo los niveles relativos de células del paciente y del donante presentes en una muestra. Además, permite hacer el seguimiento postrasplante y analizar los posibles quimerismos que puedan surgir en el caso de que las células cancerígenas del huésped vuelven a proliferar. Promega ofrece instrumentación y reactivos que cubren la totalidad del flujo de trabajo, desde la extracción de la muestra hasta su análisis por electroforesis capilar. MUNDO Biotec Terapia celular Terapias con células CAR-T Las terapias con células T modificadas genéticamente representan un hito revolucionario en el tratamiento de distintos tipos de cáncer como la leucemia linfoblástica aguda, ciertos linfomas y el mieloma múltiple. Promega Biotech Ibérica, S.L.